資料詳細

目次

第1章 序論

  1.1 化学系の学生が「遺伝子操作」を学ぶ意義について

  1.2 本書の構成

  1.3 DNAと遺伝子についての基礎知識

第2章 ゲノムDNAの抽出・精製

  2.1 細胞の破砕

  2.2 DNAの単離

  2.3 DNAの精製(RNAの除去)

  2.4 キットの利用

第3章 プラスミドの性質と抽出法

  3.1 プラスミドとは

  3.2 プラスミドベクター

  3.3 プラスミドの形態

  3.4 プラスミドの抽出・精製

第4章 大腸菌

  4.1 生きた試験管:大腸菌

  4.2 大腸菌の培養

第5章 制限酵素

  5.1 制限酵素とは

  5.2 制限酵素によるDNAの切断とアガロースゲル電気泳動

  5.3 プラスミドの構造とマルチクローニングサイト

第6章 DNAデータベースの活用

  6.1 DNA塩基配列情報検索

  6.2 遺伝子地図の作成

  6.3 クローニング

第7章 PCRによるDNA断片の増幅

  7.1 PCRの原理

  7.2 PCRで使用するDNAポリメラーゼとプライマーについて

  7.3 プライマー設計

  7.4 反応条件

第8章 大腸菌の形質転換

  8.1 プラスミドの導入

  8.2 形質転換株の培養

  8.3 形質転換マーカーとしての抗生物質耐性

  8.4 ブルー・ホワイトセレクション

第9章 遺伝子破壊

  9.1 遺伝子破壊の概要

  9.2 挿入失活

  9.3 遺伝子置換

  9.4 遺伝子欠損

第10章 エレクトロポレーションによる遺伝子導入と相同組換え

  10.1 エレクトロポレーション法とは

  10.2 相同組換え

  10.3 遺伝子破壊株の選抜

  10.4 致死遺伝子をマーカーとした変異株の選抜

第11章 ハイブリダイゼーション

  11.1 ハイブリダイゼーションとは

  11.2 DNA試料作製とブロッティング

  11.3 プローブの作成

  11.4 ハイブリダイゼーションとプローブの可視化

  11.5 コロニーハイブリダイゼーション

第12章 接合伝達による遺伝子導入

  12.1 接合伝達とは

  12.2 接合伝達で用いるプラスミド

  12.3 接合伝達による遺伝子導入操作の例

  12.4 変異株の選抜

第13章 遺伝子導入と強制発現

  13.1 遺伝子導入実験の必要性

  13.2 プラスミド上の遺伝子の発現

  13.3 相同組換えによる遺伝子導入

第14章 部位特異的変異(点変異)の導入

第15章 遺伝子クローニングの現代的手段

  15.1 相同組換えを利用した遺伝子クローニング

  15.2 人工遺伝子

第16章 大腸菌による外来遺伝子の強制発現

  16.1 発現ベクター

  16.2 発現タンパク質の回収

第17章 DNAシークエンシング(塩基配列の決定)

  17.1 ジデオキシ法

  17.2 サイクルシークエンス法

  17.3 ダイターミネーター・サイクルシークエンス法の操作

  17.4 外注による塩基配列決定

第18章 変異株の保存

第19章 遺伝子組換え実験の制限(カルタヘナ法)

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